可轻轻用手拉扯四肢，若在同一个部位出现了纹路且不明显，说明是雄性巴西龟；身体花纹，巴西龟的尾巴较为细长，离肛门较远，而雌性则相对更近；观察反应，将两只异性乌龟放在一起，巴西龟会向内凹进去，生殖器也分泌出红色。
1、轻轻拉扯四肢
想要区分巴西龟的性别，可以轻轻的去抚摸它的腹甲或者腹甲，如果巴西龟没有露出来背甲，那么说明巴西龟的性别还不清楚。
2、身体花纹
可以从巴西龟的头部看出，雄性巴西龟的腹甲呈平面状，侧颈处有着隆起的棱脊，尾巴粗短，离肛门较远。 此外雄性巴西龟的尾巴较为细长，离肛门较近，这样的特征比较好判断。
3、观察反应
当巴西龟伸出头时，眼睛呈圆形，还会有着透明的白膜，这就说明巴西龟已经死亡。 饲养者需要等待巴西龟适应2～3天后再做决定。
可以通过观察尾巴来判断，雄性巴西龟尾巴粗短、距离远，而雌性巴西龟尾巴呈细长状；体型花纹背甲，雄性巴西龟背部花纹密集，背甲窄小，且背甲较宽；腹甲内容物，雌性巴西龟腹甲带有隆起，与头颈相连。
1、观察尾巴
从外形上看，巴西龟的尾巴显得十分规则，雌性巴西龟尾巴会向下凹陷，并且尾巴根部距离肛门较远，而雌性巴西龟尾巴则不会出现这种情况。
2、体型花纹背甲
可通过观察它们的体型颜色来判断，雄性巴西龟的背甲大多是黑色或粉红色，尾巴又细又长，尾巴根部距离肛门较近，而雌性巴西龟的背甲则是黄色，且花纹也更加稀疏。
3、腹甲背壳
从腹甲的角度来看，雄性巴西龟的背部沿着腹甲和腹甲方向延伸，靠近腹甲后缘的位置一圈就代表着另一个生殖器，在进行判断时需要仔细观察腹甲和腹甲两块区域，若发现有裂痕建议将其拔掉，若无法自愈则应送往医院治疗。
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